在基因工程进行筛选时怎么筛选?标记基因会有什么变化吗?麻烦解释一下这个过程谢谢


嗯。。。怎么说~

首先搞清的一个问题就是你的质粒并不是受体细胞的质粒~

再需要搞清楚的一个问题就是质粒就是个基因环~

所以当我把目的基因和质粒剪到一起的时候~再导入受体细胞~我就得想办法看看我有没有导入成功啊~

那就得标记基因起作用了~

质粒要表达~所以一般标记基因就选择那种能在有某种抗生素环境下能生存的细菌的质粒~因为它有抗性基因~所以我把他和目的基因剪在一起导入~

成功的话~

受体细菌就能在含某种抗生素的培养基上放肆成长~至于是否本身存在于质粒中。。。我们一般都用本身就含有标记基因的质粒~因为你的标记基因也是剪进去的~

你怎么确定有没有剪成功啊。。。。


标记基因本身就在质粒上(在加入目的基因之前)目的基因插入之后,一般是不会破坏标记基因的(除非实验需要)在做好重组DNA后,将他导入受体细胞,但是真的进去了吗?这时候标记基因就有用了。一般标记基因是抗性基因或者荧光蛋白基因,比如这次是抗抗生素基因是标记基因。将受体细胞放入选择培养基。就是培养基里放入抗生素,如果没有抗抗生素基因或者该基因不表达,则不能存活。所以存活的是有质粒的细胞。它就是要筛选出来的细胞。但其实还存在问题。比如说可能导入了空质粒。如果真的问到了这个问题,也是有办法的~比如说培养出来看性状~比如说做抗原抗体杂交~

标记基因一般都是在体外用剪切连接插入到质粒中的DNA片段


第一个回答的就很好了,但我真心建议你把基因工程教材通读一遍,这是最基础的知识。生物劝退是很多,并不是说它简单,而是它性价比低
谢邀。但我真的不知道啊
质粒的抗性基因是在质粒DNA上的,当质粒成功转化进细菌之后,这个抗性基因就会表达出抗性蛋白,协助携带质粒的细菌耐受抗生素的影响。
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