在基因工程進行篩選時怎麼篩選?標記基因會有什麼變化嗎?麻煩解釋一下這個過程謝謝


嗯。。。怎麼說~

首先搞清的一個問題就是你的質粒並不是受體細胞的質粒~

再需要搞清楚的一個問題就是質粒就是個基因環~

所以當我把目的基因和質粒剪到一起的時候~再導入受體細胞~我就得想辦法看看我有沒有導入成功啊~

那就得標記基因起作用了~

質粒要表達~所以一般標記基因就選擇那種能在有某種抗生素環境下能生存的細菌的質粒~因為它有抗性基因~所以我把他和目的基因剪在一起導入~

成功的話~

受體細菌就能在含某種抗生素的培養基上放肆成長~至於是否本身存在於質粒中。。。我們一般都用本身就含有標記基因的質粒~因為你的標記基因也是剪進去的~

你怎麼確定有沒有剪成功啊。。。。


標記基因本身就在質粒上(在加入目的基因之前)目的基因插入之後,一般是不會破壞標記基因的(除非實驗需要)在做好重組DNA後,將他導入受體細胞,但是真的進去了嗎?這時候標記基因就有用了。一般標記基因是抗性基因或者熒光蛋白基因,比如這次是抗抗生素基因是標記基因。將受體細胞放入選擇培養基。就是培養基裏放入抗生素,如果沒有抗抗生素基因或者該基因不表達,則不能存活。所以存活的是有質粒的細胞。它就是要篩選出來的細胞。但其實還存在問題。比如說可能導入了空質粒。如果真的問到了這個問題,也是有辦法的~比如說培養出來看性狀~比如說做抗原抗體雜交~

標記基因一般都是在體外用剪切連接插入到質粒中的DNA片段


第一個回答的就很好了,但我真心建議你把基因工程教材通讀一遍,這是最基礎的知識。生物勸退是很多,並不是說它簡單,而是它性價比低
謝邀。但我真的不知道啊
質粒的抗性基因是在質粒DNA上的,當質粒成功轉化進細菌之後,這個抗性基因就會表達出抗性蛋白,協助攜帶質粒的細菌耐受抗生素的影響。
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