小鼠的基因鉴定,琼脂糖凝胶电泳图有很多非特异性扩增条带,考虑过小鼠样品问题,还有引物换了两家公司,1*和10*也试过,Mix也更换过,Taq酶的浓度也做了试验,但全都跑不出扩增条带?还有可能是什么原因?求大家帮忙解答 (特异性扩增条带大概是600bp marker是100bp ladder 后面三个分别是阳性阴性和水的对照,也是不清楚)


泻药

首先,我有个问题,就是为啥要用100的ladder呢?

其次,你从头到尾都没有说到你DNA的事情,请问你DNA是怎么提取的啊?DNA提取液是什么时候的啊?这明显已经不是跑胶的问题啦,明显DNA的问题更大。希望能帮到你,再见
一位师姐分享


阳性对照都跑不出来要么就是DNA有问题要么就是你pcr体系有问题。判断模板问题,就放几个其他样品。引物合适的话,cDNA也可以。


XY,去问丁香园,基因和分子我的弱项,流式可以问我,再见。


泻药,大神给的回答挺好了,我就想问一下,水,怕是应该,空白到干干净净才对吧?


首先检查一下你的dna浓度和质量怎么样 其次确定合适的pcr反应条件,高保真的酶不止 taq酶 并且不同厂家的效果都不一样。最后合适的酶 合适的引物 反应的条件需要摸索一下。ps 如果引物浓度有问题在胶上有引物二聚体,一般按照厂家的条件,这里不会有什么问题,有问题联系建议所用试剂盒的技支持,祝好运!


DNA浓度过大了,少点点样试试看。

要不就是DNA样品的问题,杂质,降解,保存不妥当。

引物很好所以胶没什么问题,如果你上述的tag,mix和primer也都没有问题的话,那应该就是DNA了吧。


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