液相色谱柱的误区

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在实际操作中,液相色谱柱的流向是不会改变的。

做实验室的你们都有一个固定的思维了,那就是液相色谱柱上标示的流向是不可以改变的。那么问题来了,大家有没有想过。这个标示的流向是用来做什么的?为什么不可以改变呢?为什么要标示一个使用的放心呢?实际上液相色谱柱的填料和工艺是相同的。标示的目的是让我们知道流动相是从那个放心流入液相色谱柱中。那么这个流入段就是***先被污染的地方。这样做的目的是为了以后的再生或者维护液相色谱柱做了一个准备。所以我们需要遵循这个液相色谱柱的规定之后开始做样。

举个列子。(我以前把已经被污染过的液相色谱柱反方向来使用。它的保留时间不是很长。但是液相色谱柱够长。所以还能继续使用一段时间。)

说明书很重要

很多朋友在使用液相色谱柱的时候自己就上,也不看看液相色谱柱的说明书。它很重要,里面记录了液相色谱柱内保存的是什么溶剂。所以液相色谱柱的系统说明书要看清楚。还有说明书上面的维护保养等。对我们都是很有帮助的东西,对于反相色谱柱可能溶剂就是乙腈或甲醇。但是正相色谱柱,可能也会试用反相色谱柱,所以。看清楚说明书。对于是不是需要更换液相色谱柱里面保存的溶剂是很重要的。、

冲洗问题。

需要使用流动相比列的水系或者有机系来清洗液相色谱柱里面的缓冲液,这样才能冲洗干净。如果你举得用流动相比列的水没有办法把液相色谱柱内部清洗干净。可以选择含有百分之10的纯水来进行冲洗。******不要使用强溶剂来进行液相色谱柱的冲洗。这样对液相色谱柱的内部损伤是很大的。

保持问题。

如果存在乙腈或甲醇里面的液相色谱柱能直接使用。

操作过程中液相色谱柱不像气象色谱柱那样需要活化,但是因为液相色谱柱的内部具有有机系,有挥发的作用。所以在使用的时候还是需要用一定的溶剂来进行冲洗。可以根据厂家来选择。

液相色谱柱应该保存在纯乙腈或甲醇中

根据第4条,色谱柱内部保存液具有挥发性,因此为了减少其挥发速度,可以添加5%-10%的水,这样的话可以在一定程度上减少一些有机系的挥发。如果再增加一个保险,我们可以在堵紧堵头后,再用封口膜封起来。同样道理,色谱柱一段时间不用后,也应该按照第4条,进行小流速的冲洗色谱柱。

关于再生:

液相色谱柱污染后把筛板卸下来超声清洗

对于液相色谱柱的污染,首当其冲的就是筛板,因此我们***常用的做法就是把柱头卸下来,把筛板拿去超声清洗。但是我们在拆卸过程中对液相色谱柱前端填料的损害远远大于污染照成的伤害,因为我们不是专业的。因此建议这一步能不做就不做。

自己填装液相色谱柱

和上面一条相同,这一步做法几乎可以把此液相色谱柱判死刑了,我们的填装工具有什么呢?就是手工的,其填装压力远远小于工厂内原始的填装压力。那么我们填装的结果会是个什么样也就很明显了。

在我看来,自己填装也就是练练手,熟悉一下这个过程,要把色谱柱维修好的可能性几乎为零。

用异丙醇冲洗再生后,柱子效果更差了

这种情况我自己就遇到过,还好那根柱子本来就打算报废了,因此也没有照成多少损失。但是这是什么原因呢?其实很简单,就是在我反向冲洗前没有把管路中的污染物冲洗干净就直接接了柱子。所以说,方法是没有错的,色谱柱受污染时,我们应该先想到仪器也污染了!

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