氣象色譜柱的生產技術早已進入了穩定期,而液相色譜柱還在群雄逐鹿的階段,競爭激烈,技術革新也層出不窮。每個公司都有自己的獨門絕技,時不時就會爆出一些新名詞。這一期,我們來聊聊這些年,液相色譜柱的那些新科技。隨著早的液相色譜柱和氣相一樣,柱子的柱體是用玻璃做的,不耐高壓。隨著液相色譜的運行壓力越來越高,現在幾乎所有的液相柱都是使用金屬來製作了。

而且變得越來越短,內部填充的顆粒也越來越

早期的填料使用過無定形的硅膠。而後發明了薄殼填料,在玻璃珠的表面塗一層硅膠。這樣的設計大大減小了渦流擴散項,也就是減小了范德姆特方程的A項,使得柱效提高了一個數量級。但是這樣的填料里硅膠只有薄薄的一層,也就是固定相容量很小,只能分離很低濃度的樣品。進而又開發了全多孔球形硅膠,比如在實驗室里,常常會備有一根經典的5um全多孔硅膠柱。根據范氏方程,人們發現更小的粒徑可以帶來高的柱效。但是粒徑越來越小之後,阻力就越來越大,需要使用更高壓的液相系統。

雖然說小粒徑柱的柱效很高,但為了用一根柱子要換一整套系統,成本是很高的。

那,有沒有辦法降低柱壓,讓普通的HPLC也能用上高效的小粒徑柱呢? 受到曾經的薄殼填料的啟發,有廠家提出了全新的設計思路,實心顆粒柱,或者叫核殼柱。自此掀起了行業內的一股研發熱潮,現在很多廠家都推出了類似柱子,這種技術每家命名不一樣,其實是一個意思。有一個堅硬的內核,而表面多孔。比起全多孔的顆粒,核殼填料的大小更加均勻,具有更低的渦流擴散。由於實心核的存在,使得填料孔體積變小,減小了範式方程B項縱向分子擴散和C項傳質阻力。既能提供更高的柱效,又能夠大大降低柱壓,使得在常規的液相色譜上也能實現類似於高壓液相色譜的快速分析效果,所以這類核殼柱,又常被稱為快速分析柱。同學們的實驗室,如果用的是傳統的高效液相色譜,可以大膽嘗試這種實心顆粒柱,確實能大大提高分析速度,又能擁有不錯的柱效。

不過這類柱子的使用,從硬體到參數,和傳統的柱子都有不同,以後有機會再給大家講哦。

技術的創新來自於應用的需要。雖然硅膠柱依然是主流,但也存在明顯的缺點。硅膠******的問題是耐酸不耐鹼。通常耐受範圍是pH2-8,pH太高,硅膠骨架就開始溶解。如何讓色譜柱更耐受鹼性的流動相呢?這對於分析鹼性藥物意義重大。除了化學性質更穩定,聚合物固定相在分析大分子化合物有特殊的優勢。很多大分子是有立體結構的,或者說是有特定的形狀。

如果在聚合物的表面鍵合上互補的形狀,就可以保留特定形狀的分子了。

另一種思路是改進硅膠的合成技術。比如由美國Unger教授提出,隨後被全力發展的無機-有機混合顆粒,也叫無機-有機雜化技術,也可以增強硅膠的化學穩定性。傳統的硅膠柱之所以不耐鹼,是因為pH太高,硅膠骨架的Si-O鍵會斷裂。而雜化了有機顆粒的硅膠小球里,更穩定的Si-C鍵代替了一部分Si-O鍵,液相色譜柱的pH範圍可以拓寬到1-12。

沒有100%完美的選擇,每一種設計都有自己的長短板,還有想要了解的朋友歡迎諮詢成都摩爾科學儀器有限公司

本文轉於(成都摩爾科學儀器有限公司)

推薦閱讀:

相关文章