實驗新手一名,最近根據文獻剛買了根液相色譜柱,準備在液質上使用(因為文獻上是用這根柱子跑的液質),但師兄說你得先確定這根柱子能不能在液質上使用,因為hplc和lc-ms的柱子有區別,混用可能會導致填料污染質譜,而柱子的說明書上也沒有明確寫明是否可以用於液質,所以,我該如何判斷這根柱子能否在液質聯用上使用呢


可以用,但能換一根UPLC柱更好

但不是污染質譜的原因。

質譜會不會被色譜柱污染取決於你的填料性質。HPLC柱在UPLC上柱壓不大的話不會有很大問題。相反即使是UPLC柱,也會可能因為流動相的問題造成填料脫落,比如T3,在質譜檢測時用高比例有機相看看有沒有聚合物峯就知道了。

至於峯形,肯定是HPLC柱不會很好,而且分析時間更長。

主要是流速是否與ESI源匹配,會影響靈敏度。


單純對色譜柱而言不,HPLC和LCMS沒有明顯差別。所以這個色譜柱可以用。

決定能否用於液質的主要因素是流速和流動相是否兼容。一般來說,質譜要求不能使用非揮發性緩衝鹽且鹽濃度不高於10mmol/L,不可使用離子對試劑和高電離能力的試劑,比如六氟異丙醇,不可使用極端pH。

有些色譜柱會標稱LCMS級別,一般分離性能會更好一些,且柱流失和污染更小,相應的色譜圖基底更乾淨。


主要跟離子化方式的最佳流速有關。

ESI源的最佳流速為0.2ml/min,最好用2.1的柱子。你這個4.6的柱子,流速為1ml/min也可以,但要把霧化器和乾燥氣都調大,即使這樣霧化效果也無法保證,所以最好採取柱後分流,使進入質譜的流速較低。

APCI源的最佳流速為1.0ml/min,你這4.6的柱子是最匹配的。


諮詢下液相廠家,和柱廠家,不知道廠家地址,可以去儀器問答網找下相關廠家聯繫方式。


首先,HPLC與LC-MS/MS的色譜柱使用是完全相同的,不存在填料污染

你師兄想表達的其實是緩衝液使用不一樣而已

其次,你的Polar柱還是非常適合LC-MS/MS的,對於極性可以增強保留,可以提供Π-Π相互作用,使用甲醇作為流動相效果尤其的好。

最後,你的柱長和內徑都不適合LC-MS/MS,250 mm的柱長,儀器再平衡都不知要多久,當然你做代謝組學的話當我沒說過這個。。而且內徑越小,靈敏度越高,你這是分析柱的內徑。LC-MS/MS的理想色譜柱是 2.0 mm × 50 mm, 3 μm粒徑


簡單來講,不建議,但可以,前提是將流速降低,結果是峯行不好看。


看下流速 柱壓 流動相 兩個是不是匹配啊


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