腦定位注射實驗

腦立體定位技術被廣泛的運用於腦的損毀、刺激和腦電記錄的精確定位中，成為研究腦結構和功能必不可少的工具。腦立體定位技術主要是使用腦立體定位儀作為定位儀器，利用某些顱骨外面的標誌（如前囟、後囟、外耳道、眼眶、矢狀縫等）或其它參考點所規定的三度坐標系統，來確定皮層下某些神經結構的位置，以便在非直視暴露下對其進行定向的刺激、破壞、注射藥物、引導電位等研究，是神經解剖、神經生理、神經藥理和神經外科等領域內的重要研究方法。常用的實驗動物，如大鼠、小鼠、貓等高等哺乳動物以及鳥類，其均有完全的外耳道，可用（耳棒）來定位。在確定了顱外標記之後，就可按腦立體定點陣圖譜所提供的數據進行定位操作。

腦定位注射是將藥物直接注入腦室內。慢性實驗須先將套管埋人腦內，管端距側腦室壁約1mm，並固定子顱骨上，實驗時將注射管通過套管進入側腦室，注射微量藥物。急性實驗可將動物頭部固定於立體定位儀上，將注射管直接插入腦室注射，可用於觀察不同藥物注入腦室後各種生理指標和變化。

大鼠腦定位注射實驗操作：

器械準備：腦立體定位儀1套，配套牙科鑽1套，微量注射器1個，眼科剪1把，鑷子2把，動脈夾2個，醫用小棉簽等。

實驗大鼠稱重，7%水合氯醛腹腔注射麻醉，麻醉劑量5ml/kg。大鼠頭部備皮。75%酒精棉球消毒（亦可用碘伏消毒液）。

麻醉後的大鼠固定於腦立體定位儀，具體操作為大鼠上門齒卡入橫杆，調節旋鈕壓緊鼻桿；將耳桿插入大鼠耳道，平衡調節左、右耳桿，使大鼠兩耳間連線與耳桿在同一直線上，保證左、右耳桿的刻度位置相同後調節旋鈕鎖緊耳桿。大鼠固定完好的判斷標準：鼻對正中，頭部不動，提尾不掉，目測大腦放置水平（使顱骨水平）。

眼科剪縱向剪開大鼠頭部皮膚約3cm，用鑷子沿顱骨表面剝離骨膜結締組織並剪除，用無菌棉球蘸去浸出的血液，將顱骨表面清理乾淨，暴露前後囟。

調節腦定位儀上橫縱坐標旋鈕使牙科微孔鑽位於前囟點上方並輕觸該點，以Bregma點作為三維坐標系的參考點（零點）。

根據注射位置的不同，及大鼠重量的不同，注射坐標不同。此處以普通SD大鼠（350±50g）側腦室注射為例，通過查詢腦立體定點陣圖譜確定需要定位的核團位置，確定坐標值，即ML值（X軸）、AP值（Y軸）、DV值（Z軸）。側腦室位置為前囟點旁開1.5mm，向後囟方向1.1mm ，深4.5mm（坐標即為±1.5，-1.1，-4.5）。調節X軸（1.5個單位）及Y軸（1.1個單位）旋鈕移動操作臂到坐標位置，使用微孔牙科鑽緩慢打孔。鑽孔另一種操作法為確定鑽孔位置後在該點蘸墨打點標記，後手持牙科鑽進行鑽孔。顱骨鑽穿時有明顯落空感，此時應小心操作避免傷及硬腦膜。