[生化实验12]106/6/7(糖类侦测)
1.实验目的: 认识糖类,并且估算市售手摇杯饮料中所含糖类之种类与热量(以茶○会、五○岚为例)
2.实验原理: 还原糖(含有醛基或酮基之糖类)在碱性环境下会将铜还原,而自身氧化,形成有色沉淀(黄~砖红之氧化亚铜,故观察是否产生沉淀即可知待测液中是否含有还原糖。
3.实验仪器与试剂:
(1)仪器: 干式加热器(hot plate )、 Pipetment和tips 、 Eppendorf 、 试管 、 1000 ml烧杯 、 离心机 、
(2)试剂: 糖试液 ( 1%蔗糖、1%葡萄糖、1%果糖、0.5%果糖、0.25%果糖、0.1%果糖 )、 待测液 ( 稀释10倍之半糖去冰手摇杯饮料(茶○会、五○岚) )、 Benedict试剂
4.实验步骤:
(1) 吸取糖试液各0.5 ml于标记好的空试管中
(2) 各加入1ml Benedict试剂
(3) 将1000 ml烧杯装入一半的水,置于干式加热器上加热
(4) 水沸腾后将所有试管放入,隔水加热5分钟
(5) 取出试管,冷却后摇晃混合均匀并倒入标记好的Eppendorf中,对称置入离心机以10000 rpm转速离心10分钟
(6) 比较沉淀物多寡及上清液颜色,判断待测液所含之糖类种类并估算其含量
5.实验结果:
加热后:
离心前:
6.问题与讨论:
A.讨论
(1) 沉淀物:试液加热后准备倒进eppendorf时,有些沉淀物倒不出来,所以实际沉淀物的量应该是更多
(2) 加热试管时一次放入太多,温度会降低
(3) 市面上饮料多用高果糖浆而非蔗糖,原因是若为达到相同甜度,必需用更多的蔗糖,若是用甜度较高的高果糖糖浆可以节省成本
(4) 清液不同颜色:铜离子在不同温度下会呈现不同颜色
(5) 糖的种类:市面上有各式各样的糖,常见有白糖、红糖、黄糖、黑糖,成分皆为蔗糖,主要差别在于蔗糖的纯度,颜色最深的黑糖杂质最多,甜度最高;白糖纯度最高,然而甜度最低。而另外一种饮料中常见的代糖—阿斯巴甜(天门冬醯苯丙氨酸甲酯),并非真正的糖类
B.问题
Observation 1:1%sucrose、1%glucose、1%fructose, which is positive and which is negative? why?
Answer:蔗糖为非还原糖,故无反应(沉淀);其余皆为还原糖,与Benedict试剂反应产生沉淀。判断手摇杯饮料中含还原糖
Observation 2:
(1)Estimate the fructose content in sample.
五○岚:沉淀量少于0.1 %之试液,以0.1 %计
0.1% X 2 = 0.2% = 0.2 g/100 ml =1 g/500 ml
1g x 10 =10g
1杯饮料中约有10 g的果糖
茶○会:沉淀量介于0.1 %与0.25 %之试液间,较偏向0.25 %,故以0.25 %计
0.25% x 2 = 0.5% = 0.5 g/100 ml =2.5 g/500 ml
2.5g x 10 =25g
1杯饮料中约有25 g的果糖
(2) Estimate the sugar content in a cup of 500 ml drink .
1颗方糖约5g
五○岚:2颗方糖
茶○会:5颗方糖
(3) Estimate the calories in a cup of 500 ml drink .
1 g糖类4大卡
五○岚:40大卡
茶○会:100大卡
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其实生化实验课做的实验当然不只这些,只是我们是4人一组,轮流写报告
所以我也只能放我自己写的部分
看看实验结果
嗯以后如果要在五○岚和茶○会之间选择,我要选五○岚xd
虽然说喝饮料从来都不是健康的事就是了╮(╯_╰)╭
但饮料真好喝(打飞