模型综述

骨关节炎( Osteoarthritis ,以下简称 OA )是一种退行性关节疾病,又称增生性关节炎、退行性关节炎或骨关节病,是一种中老年人群中的常见病、多发病。主要侵害关节软骨、骨和滑膜组织,导致关节疼痛、畸形和功能障碍,从而影响病人的活动能力。

病变特征:正常关节软骨呈浅蓝白色,半透明,光滑而有光泽,具有耐磨、传导关节负荷、吸收震荡和润滑关节等功能。退变的关节软骨表面不光滑,缺乏光泽,可见龟裂,重者可有软骨面的缺损,其缺损范围及深度在病变的不同时期各异。

发生机制:骨关节炎的发生机制复杂,一般认为是多因素联合所致。关节应力改变是其重要原因。在诱发模型中,造成膝关节应力改变及关节不稳,所诱发的OA模型是目前常用的。关节内干预模型,手术操作较复杂,创伤大,出血及创伤性滑膜炎易影响OA早期软骨、滑膜的生化代谢,不宜用于探讨药物对早期OA的生化影响及观察OA早期病变。关节外诱发的OA,其优点在于无关节损伤,不存在创伤性滑膜炎干扰,方法简单,创伤小,成功率高,更接近人类OA的病理过程,可用于观察OA 早期病理改变及研究药物对骨关节病变的影响。目前研究主要集中于软骨细胞超微结构,其软骨细胞凋亡、软骨基质生化代谢、细胞凋亡与基质降解的关系等方面。

纽西兰大白兔骨关节炎模型的建立:

实验器材

剪刀、石膏布(淘宝购买)、医用纱布、医用胶带、干棉球、酒精棉球、注射器(10ml)。手术器械:眼科剪1、弯镊1对、(动脉夹2)、止血钳2-3把。

实验试剂:

75%酒精、7%水合氯醛

实验动物:纽西兰大白兔,2~3kg

造模过程

动物适应性喂养动物房12h-12h昼夜交替,保持兔子自由饮水、进食,温度23-25℃,适应性喂养一周后进入实验。

兔子耳缘备皮,耳缘静脉注射7%水合氯醛l麻醉(麻醉剂量视瞳孔状况决定,此模型可采用低度麻醉,约6ml左右就可以了。此法用于新手,如操作者已熟练抓取兔子,可将兔子不麻醉,直接将其固定于小鼠笼子里面外漏后肢即可开始后续造模操作,但要注意用力轻柔,兔子有攻击性,蹬后腿划伤皮肤)。

此造模过程需要2人共同协助完成,兔子后肢备皮去毛,牵拉右腿使右膝关节处于伸直位,将兔右后肢于腹股沟以下1.5cm至裸关节下3cm(趾端)先包裹医用无菌纱布,3层左右,石膏布浸水2-3min(冒泡),小心拧干水分。

将处理好后的石膏布于腹股沟以下1.5cm至裸关节下3cm(趾端)沿纱布继续包裹(不可过松、过紧),约4-5层,最后用医用胶带缠裹固定。等石膏干硬(冬季可用吹风机加热)后,如上右图,将绑好后的兔子放回兔笼。

取材:空气栓塞法处死,切下实验兔整个右腿。从兔右膝髌骨内侧纵行切开,剔除交叉韧带、内外侧半月板、部分关节囊等附属软组织,暴露右膝胫骨平台。

注意事项

1、兔子造模后每天密切观察每只兔子缠裹情况,一旦发现有肢端明显肿胀、张力性水泡或溃烂及石膏松脱、咬损严重等现象,则立即卸掉重打。此观察过程非常重要,如未及时发现重打石膏,造模失败率相当高。

2、取材拍照需注意拍膝关节统一部位和方向,图片要清晰,能看见明显病变。

本文章来自威斯腾生物


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