緊接著,研究人員發現儘管PTEN在覈質中均有分佈,但主要是細胞核內分佈的PTEN發生了Y240磷酸化。染色質結合蛋白分離實驗發現WT-PTEN能夠結合染色質並且IR處理能增強這種結合,同時也伴隨著pY240和RAD51水平的上調。檢測IR處理6h後H3K9me3(染色質凝集標誌)水平發現在WT-PTEN細胞內其水平降低,亦說明PTEN結合染色質可以促進其鬆弛,以保證DNA修復蛋白能夠進入損傷處。與此同時,研究人員在U87細胞中分別轉入了磷酸酶功能缺失的G129R-PTEN和C124S-PTEN突變體,驗證了pY240-PTEN在DNA修復中的作用依賴於自身的磷酸酶活性。
PTEN缺少DNA結合結構域,那麼是什麼因子在PTEN與染色質結合之間起到聯繫橋樑的作用呢?通過質譜分析以及體外驗證實驗,研究人員確定了Ki-67(細胞增殖標誌蛋白)為PTEN結合染色質的聯繫蛋白,並且pY240-PTEN是通過結合Ki-67上的PP1-BD(protein phosphatase 1-binding domain)結構域從而被招募至染色質上發揮作用。
更進一步的研究表明,原位移植EGFRvIII/Y240F-PTEN星形膠質瘤細胞的Y240F knock-in小鼠較移植了EGFRvIII/WT-PTEN星形膠質瘤細胞的小鼠而言小鼠存活時間延長,成瘤能力下降。採用FGFR抑製劑對移植了成膠質細胞瘤細胞的小鼠進行處理,在這之後結合IR處理,腫瘤細胞生長明顯受到了抑制。這些結果也為臨牀研究中利用FGFR抑製劑對GBM患者有針對性的結合放射治療提供了有效的理論支持。