人體中己糖激酶有四種同工酶， 1型同工酶（HK1）主要分佈在腦，HK2主要分佈在骨骼肌，HK3主要分佈在白細胞，HK4主要分佈在肝臟。因為HK4與另外三種同工酶差異較大，對葡萄糖的特異性強，所以又被稱為葡萄糖激酶（glucokinase，EC 2.7.1.2）。以前關於葡萄糖激酶是不是己糖激酶的同工酶有一些不同說法，但現在大家已經認可它們是同工酶，而且IUBMB（國際生化與分子生物聯合會）在己糖激酶的說明中也明確寫出肝臟中的同工酶稱為葡萄糖激酶。

葡萄糖激酶的性質的確與其它同工酶差異較大。葡萄糖激酶存在於肝臟和胰島b-細胞中，分子量約50 KD，而其它同工酶分子量約為100 KD。葡萄糖激酶對底物的親和力低，Km是10 mM，而肌肉己糖激酶（HK2）的Km只有0.1 mM。還有一點，己糖激酶的活性受反應產物6-磷酸葡萄糖的別構抑制，而葡萄糖激酶卻不受別構抑制。

乍看起來，似乎葡萄糖激酶催化能力很弱，好像沒什麼用。其實，葡萄糖激酶對底物的低親和力與肝臟的生理功能密切相關，對於機體血糖穩定極為重要。平時細胞中的葡萄糖濃度約為5mM，葡萄糖激酶活性不高，所以肝臟平時對血糖的降解很少。但進食後血糖升高，肝臟中的葡萄糖激酶就會活躍起來，將葡萄糖磷酸化。因為而葡萄糖激酶不受反應產物抑制，所以能夠快速降低血糖。生成的大量6-磷酸葡萄糖不僅可以通過糖酵解途徑氧化分解，還可以進入磷酸戊糖途徑，或者合成糖原。否則，光靠糖酵解是不足以快速降低血糖的。

同樣，骨骼肌中的己糖激酶對底物親和力高，又有產物抑制，也與其生理功能一致。骨骼肌運動時大量消耗葡萄糖，底物濃度可能會暫時降低。酶的低Km可以保證反應速度不會顯著下降，以提供充足的能量。而當產物6-磷酸葡萄糖積累的時候，就說明已經不需要高速酵解了，所以酶活性下降，以避免浪費。總之，HK2負責為肌肉提供能量，HK4負責降低血糖。雖然工作內容相同，但生理功能不同，這就是同工酶的含義。

另外，葡萄糖激酶是誘導酶，血漿中葡萄糖的濃度升高可以誘導葡萄糖激酶的合成，而且胰島素也可以促進其合成。

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