標籤抗體(Tag Antibody)

標籤抗體,別名為抗原表位,又稱抗原決定簇,是抗原分子中決定抗原特異性的特殊區域或基團,是與抗體特異性結合的結構或序列。隨著生物技術的發展,科研人員可以通過DNA重組技術,構建包含目的基因以及表位標記的融合蛋白,進而通過特異性標籤抗體對其鑒定與純化,以達到研究的需求。

隨著生物技術的發展,研究人員常利用DNA重組技術構建包含目的基因以及表位標記的融合蛋白,進而通過特異性標籤抗體對其鑒定與純化,以達到研究的需求;同時利用重組雜合體中含有一個多肽融合單體(親和標籤)這一特性,其也被廣泛用於輔助目標蛋白的純化。總之標籤抗體是開展基因蛋白表達、信號轉導和基因功能研究的常用工具。

標籤抗體(Tag Antibody)可用於檢測和純化各種商品化表達載體上的標籤序列,籍以分析檢目的蛋白的表達含量及其功能。其原理是抗原—抗體反應,這些標籤抗體可以高度特異地結合對應的標籤融合蛋白。

常用標籤包括:Flag、Myc、HA、His、GST、MBP等。

Flag標籤系統利用一個短的親水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目標蛋白;其純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。

Myc標籤(序列為:EQKLISEEDL)已成功應用於WB雜交技術、免疫沉澱IP和流式細胞術中。因此可用於檢測重組蛋白在細菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳細胞中的表達情況。Myc重組蛋白質可通過偶聯Myc標籤抗體到二乙烯碸活化的瓊脂糖上而進行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會降低蛋白質的活力,因此Myc標籤系統廣泛應用於檢測但很少用於純化。

HA標籤系統利用一個HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目標蛋白。HA標籤可位於蛋白質的C端或N端,該系統已廣泛應用於多種細胞類型,相應的HA標籤抗體也被廣泛運用。

His標籤是由6個組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設計用於重組蛋白的吸附純化。由於分子量小,且較容易分離和純化,是目前使用最廣泛的一種。

GST標籤體系具有蛋白表達率高,表達產物純化方便,利於GST抗體製備的特點。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過親和層析得到。

MBP(麥芽糖結合蛋白)標籤蛋白大小為40kDa,由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在細菌中表達,MBP可以融合在蛋白的N端或C端。可用MBP抗體或表達的目的蛋白特異性抗體檢測MBP標籤標記的重組蛋白。

華美標籤抗體特別推薦

Myc tag Monoclonal Antibody

貨號:CSB-MA000041M0m

種屬反應性:All

免疫原:EQKLISEEDL (Myc) synthetic peptide conjugate to KLH

應用範圍:ELISA, WB, IF, IP

引用文獻:The double-edged sword of endoplasmic reticulum stress in uremic sarcopenia through myogenesis perturbation , Jheng JR,et al. J Cachexia Sarcopenia Muscle,Jan 29(IF=12.511)

—END—

——華美生物·讓科研變得有溫度!——

關注華美官方微信後台回復【免費申領】


推薦閱讀:
查看原文 >>
相关文章