pcr條帶不亮，和師兄一起做pcr，一樣的操作一樣的體系，為什麼師兄的條帶比自己的亮很多？
後面自己有做了一次，還是條帶亮度不夠 要哭了
不要看亮度，機器曝光出來的亮度都是自動曝光出來的。
和你的Marker相比較，看看你用的Marker說明書的DNA濃度，算一下你Marker上樣的DNA質量，和你自己跑出來的條帶比一下，就知道你的PCR產物質量。
半定量跑膠的條帶你要那麼亮幹什麼，想亮一些就延長曝光時間或者跳大增益就是了，沒啥實際含義。
亮不亮沒啥關係，有和沒有才有關係，沒事，亮度這種關係有點玄，配膠的時候染料加的多少呀，加的溫度呀，還有PCR的模板定量完全一樣嗎？這種問題都不是重點。有，夠後續實驗就OK。
這個其實是關鍵問題:我認為的實驗操作和我實際的實驗操作，你能找到跟你師兄實際操作時的差距，就真正入門了。
我之前跑pcr條帶也不是很亮，我導師說膠回收，然後以膠回收的dna為模板，再跑一次pcr。
你確定每次做出來都是這樣的結果，多做幾次就沒事。再者，亮度問題也不影響你後面構建質粒的。
幾點建議，第一，多看看用的相應的酶的參考冊子，裡面的解釋很詳細。第二，遇到問題不要著急，明白你做這個實驗的目的是什麼。第三，推薦一個網站，ResearchGate | Share and discover research.
祝你好運！
PCR退火溫度，延伸時間設置的不一樣吧
會不會是槍的問題？而且亮不亮不重要，重要是能p出來之後進行接下來的實驗能否成功
照膠的時候參數設置不一樣？
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