PCR 產物凝膠電泳的條帶亮度能否反應出PCR 反應前模板DNA 的濃度?
如果想知道pcr反應前模板DNA的濃度,應該去做一下絕對定量。可以通過標準曲線計算或者用數字PCR。
跑電泳只能在一定程度上定性的反應出PCR產物濃度。
一般來說是可以的,但比較僥倖,實驗不嚴謹,也不夠來做具體定量。可以做個膠產物回收具體測下DNA濃度。但是可能發現糾結過後不如去跑一下qpcr
你的問題標籤裏甚至都已經有Q-PCR這個詞了。。
不過需要內參,沒人能保證自己把每個反應的條件控制得如此精確,如果沒有內參,這種依據是不可靠的
這個不好做判斷。如果可以的話,你跑一下絕對定量的產物,4個(我一般做4個)std電泳條帶亮度差不多,但input肯定不一樣。
可以看跑膠的DNA的量,具體可以看一下你的DNA marker說明書。但是反應前DNA模板的量貌似不能……
看是多少個循環,看下qPCR的實驗圖就知道怎麼回事了
能大概反映
條帶亮度和寬度綜合判斷吧,要和marker比較
可以設置稀釋不同濃度的DNA,跑電泳,
qubit儀器加點染液
本人認為這個不能確保反映出反映前DNA濃度,pcr破壞的DNA在條帶上不一定能體現出來
一般不能,但是可以用內參這種穩定表達的基因條帶定性判斷
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