小鼠的基因鑒定,瓊脂糖凝膠電泳圖有很多非特異性擴增條帶,考慮過小鼠樣品問題,還有引物換了兩家公司,1*和10*也試過,Mix也更換過,Taq酶的濃度也做了試驗,但全都跑不出擴增條帶?還有可能是什麼原因?求大家幫忙解答 (特異性擴增條帶大概是600bp marker是100bp ladder 後面三個分別是陽性陰性和水的對照,也是不清楚)


瀉藥

首先,我有個問題,就是為啥要用100的ladder呢?

其次,你從頭到尾都沒有說到你DNA的事情,請問你DNA是怎麼提取的啊?DNA提取液是什麼時候的啊?這明顯已經不是跑膠的問題啦,明顯DNA的問題更大。希望能幫到你,再見
一位師姐分享


陽性對照都跑不出來要麼就是DNA有問題要麼就是你pcr體系有問題。判斷模板問題,就放幾個其他樣品。引物合適的話,cDNA也可以。


XY,去問丁香園,基因和分子我的弱項,流式可以問我,再見。


瀉藥,大神給的回答挺好了,我就想問一下,水,怕是應該,空白到乾乾淨淨才對吧?


首先檢查一下你的dna濃度和質量怎麼樣 其次確定合適的pcr反應條件,高保真的酶不止 taq酶 並且不同廠家的效果都不一樣。最後合適的酶 合適的引物 反應的條件需要摸索一下。ps 如果引物濃度有問題在膠上有引物二聚體,一般按照廠家的條件,這裡不會有什麼問題,有問題聯繫建議所用試劑盒的技支持,祝好運!


DNA濃度過大了,少點點樣試試看。

要不就是DNA樣品的問題,雜質,降解,保存不妥當。

引物很好所以膠沒什麼問題,如果你上述的tag,mix和primer也都沒有問題的話,那應該就是DNA了吧。


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