想求助一下各位大佬,胚胎幹細胞的培養和其他細胞的培養在實驗操作上有什麼不同,是不是在操作上比普通細胞要複雜很多。


謝邀~

不要緊張,在操作上大同小異。

您可以看看我在另一個問題下的回答:

養細胞有哪些經驗和教訓? - 無中生有1120的回答 - 知乎

https://www.zhihu.com/question/21306808/answer/150521625


胚胎幹細胞,分很多種的,按物種分,人的比小鼠的難。按培養條件,無飼養層比有飼養層的難。不過目前gibco及stem cell公司都研發出了無飼養層的培養幹細胞培養體系,商品化的培養基可以直接買來用,但是有點小貴。培養處理幾乎是每天換液,控制細胞密度,密了稀了都可能分化。不知道題主說的普通細胞是什麼細胞。個人理解為原代細胞和永生化的細胞系。原代細胞其實培養因細胞而異吧,本人眼科,視網膜也就是偏神經細胞的原代細胞其實也並不好養,很難傳代。但是角膜,結膜等上皮類的就非常好養。細胞系就不用說了,新手練手之必備神器。
操作更小心
要有滋養層細胞,或者添加很多輔助生長因子和基質膠
謝邀。簡而言之,看目的,也看物種。比如考慮用於臨床的,那麼培養基成分里不能有動物成分,血清應該用其他化學成分替代。其他目的,也要考慮是不是添加feeder細胞,是不是添加2i等等。常用的小鼠細胞系E14,非常好養,培養基成分也不是特別複雜。當然,細胞因子LIF是比較燒錢的

呃。。。不知道你為什麼會邀請我。完全不懂,不敢發言。


我是個愛好者,沒做過實驗,有幾個問題想諮詢一下。

1.受精卵可以直接移植進受體嗎?有什麼需要注意的嘛?

2.分割的胚胎或細胞直接移植給受體,或在體外培養到囊胚階段再移植,有什麼區別?


從來沒養過幹細胞,但是我老公養過,養幹細胞和養普通細胞,每個環節都不一樣,培養基不一樣,傳代方式不一樣,唯一一樣的就是,都需要無菌操作,都在37度CO2培養箱培養。基本上,養了幹細胞,就像養了一個高需求的孩子,每天都必須管一管,稍不留神就狀態不好,不像腫瘤細胞系那麼皮實。

了解得不多,我老公也沒有知乎號,抱歉幫不到你太多。


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