ELISA酶聯免疫吸附測定中，為什麼不能直接用酶連接的一抗進行測定？
酶聯免疫吸附測定中，需要先加一抗，再加酶連的二抗才能測定結果，那為什麼不能把酶連接在一抗上直接測定？是由於技術限制嗎？一抗和二抗有什麼本質區別嗎？
舉個例子先說明下這個方法：不知道題主知道肉夾饃這個東西沒有，ELISA就好比你在板子上固定一層餅，然後再拿肉去鋪它，其中臘汁肉可以特異性的和餅結合，而五花肉培根或者孜然炒肉什麼的不可以，然後就被洗脫掉了，最後拿出另一個奇特的餅，為什麼它奇特呢，因為它上面寫著「我是臘汁肉夾饃」！這種餅雖然奇特，但是其實不要求它特異性和臘汁肉結合，只要是肉肉其實就可以了，畢竟現在板子上只剩下臘汁肉了，最後洗掉沒有和肉肉結合的帶走「臘汁肉夾饃」標記的餅，然後你數有多少個「臘汁肉夾饃」標記留下來，就知道之前的肉肉里有多少臘汁肉了。這裡需要考慮的是，有可能你的臘汁肉很少，這樣其實有一些在板子上的餅最終不會有任何肉掛在上面，也不會有「臘汁肉夾饃」的標記了。（如果完全沒有臘汁肉，那也就不會有臘汁肉夾饃的標記留在上面了）
題主問得這個問題，就好比我用帶著「臘之肉夾饃」標誌的餅先和板子結合，那問題就出來了，第一，既有標記又特意性結合臘汁肉的餅很難做，當然這不是重點，重點是，最後你數有幾個臘汁肉夾饃的餅不取決於臘汁肉的數量了，而是看你在板子上放了多少餅，即便餅和臘汁肉特異性結合，當臘汁肉不夠甚至沒有的時候還會有很多白餅說自己是「臘汁肉夾饃」，拜託你就是個白餅子，你充什麼肉夾饃嘞！！這樣豈不是「掛羊頭買狗肉」……哦，不對，是掛「臘汁肉夾饃」賣一部分臘汁肉夾饃和一部分白餅子，真是黑心商家呀。。。回答完問題肚子餓了是個什麼鬼……
1，操作方便，不用每種一抗都要連酶。2，連在二抗上有信號放大作用。
如果酶直接連接在一抗上，不用加樣，洗滌後加顯色液都能顯色，明顯的假陽性，還有什麼意義呢一抗和二抗沒有什麼本質區別，都是針對抗原製備的特異性抗體，但要注意單抗與多抗的區別，一抗和二抗一定不能是同一個單抗，因為每一個單抗對同一抗原只有一個特異性結合位點，若一二抗一樣，二抗就結合不上抗原，失去檢測意義了。鹵煮說的這應該是雙抗夾心法，像檢測半抗原小分子物質（農殘獸殘），只能用競爭法測
還有一種情況，一抗是直接針對抗原的抗體，二抗可以針對同源的抗體，酶標記一抗價格昂貴，標記二抗有放大作用，
可以，這叫直接ELISA。但每次做要自己連酶，好麻煩的說
請問...用酶連接的一抗測定.....還有必要測定蛋白了么......你不加蛋白照樣有顯色結果啊.......一抗是捕獲抗體而二抗是檢測抗啊，就是為了特異性識別被檢測的抗原啊......也就是蛋白.....
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