在講基因工程小鼠模型的繁育路線之前,小編還是想花一期篇幅來跟大家一起溫習一下小鼠飼養繁育的基礎 ——「吃 住 行」與「戶籍登記」。
小鼠深諳少食多餐之道,因為它們的胃容量小,需要隨時採食。
小鼠的門齒是終生不斷生長的,通過啃咬磨牙控制牙的長度。所以吃的顆粒飼料要有一定比例的粗纖維,具有一定的硬度,以便小鼠磨牙。平時飼料要放在專用容器中保存,並放在通風乾燥處,一周內用完。
飼料的消毒有兩種方法:
1、預真空高壓濕熱消毒,此法破壞其中的營養成分較多。
2、Co60射線照射,這種方法對營養成分的破壞很小,不過成本比較高。
小鼠喝的飲水,必須使用經過多級過濾的純凈水或經過高溫高壓滅菌處理的無菌水。要保證飲水的連續不斷,記得檢查瓶塞,防止瓶塞漏水造成小鼠溺死或飲水管堵塞使小鼠發生脫水。
小鼠住的SPF級動物房在各方面都受到嚴格的監控。
墊料是直接接觸小鼠的鋪墊物,可以吸濕、保暖、作窩。所以要選擇吸水性好、無刺激性、無粉塵、無毒的墊料。常見的墊料比如玉米芯、木屑等,需高壓滅菌使用。
小鼠排泄物發酵分解產生的污染物中濃度最高的是氨。室內溫度上升、密度增加、通風條件不良、排泄物或墊料未及時清除時,都可能使室內氨濃度上升。氨濃度升高後會刺激小鼠粘膜(比如鼻腔、呼吸道等)。所以除了每周要更換墊料和清洗籠具1-2次(IVC籠具可視情況適當延長更換周期),保持小鼠的清潔乾爽以外;還要控制飼養密度,不能過度密集,一般小籠飼養每籠不超過4-5隻成年小鼠。
SPF級小鼠要出行也必須全副武裝。
短途運輸小鼠也要配置專用車輛,由專人負責,並對車輛定期消毒。車輛應裝有空調設備,車內溫度也要控制在20-26度。運輸籠具須經過消毒滅菌,盡量採用小型嚙齒動物專用運輸箱,保證充分換氣並防止外面微生物污染,維持SPF級環境。運輸箱在車裡要固定,以防急剎車或顛簸。
如果需要長途運輸小鼠,在運輸箱內要添加足夠的果凍供小鼠採食。不過經過遙遠的路途顛簸,小鼠在到達目的地後往往會出現體重的減輕,並或多或少產生一些應激反應。因此在接收小鼠後最好不要立即進行實驗,而是讓小鼠休息2-7天,緩一緩,適應新的環境。
不同品系、不同性別的小鼠不能放在一個運輸箱內。不過,有時候在小鼠數量很少的情況下,可以選用帶有隔斷的運輸箱來運輸不同品系或不同性別的小鼠,可以節省空間和成本。
由於小鼠皮膚沒有汗腺,唾液分泌能力也有限,因此運輸途中如果環境溫度升高,小鼠只能以體溫升高、代謝率下降以及耳血管擴張來加快散熱。如果環境持續高溫(比如34度以上)就會引起死亡或產生後效應。所以盡量避免高溫天氣運輸,減少小鼠的應激和死亡。
小鼠出生後就應該及時做好登記與記錄,做好「戶籍」工作。
小鼠常用編號方法
1.染色法
染色標記法是用毛筆或棉簽蘸取化學藥品,在實驗動物體表不同部位塗上斑點,以示不同編號。缺點在於若實驗時間較長,顏色可自行消褪,黑色毛色小鼠不易上色,再加上動物之間互相摩擦,尿、水浸濕被毛等原因,均可使編號不清。一般僅用於實驗周期很短以及小鼠數量不多的情況。
常用染液有: 3%-5%的苦味酸溶液(黃色); 0.5%的中性品紅溶液(紅色); 2%的硝酸銀溶液(咖啡色)。
2.耳孔法
可以用專門的耳孔機在小鼠耳朵上打孔或造成缺口,或者用剪刀在耳邊緣剪出不同的缺口進行編號。在剪緣或打孔後用消毒滑石粉抹於局部,以利癒合後辨認。
3.斷趾法
新生小鼠可根據前肢4趾,後肢5趾的切斷位置來編號。斷趾時,應切斷其1段指骨,不能只斷指尖,以防傷口痊癒後辨別不清。如果採用斷趾法來給小鼠編號「上戶口」的話,為了最大程度降低小鼠的疼痛,必須在小鼠出生後7天內進行編號。超過7天後,就需要先麻醉再斷趾編號。
小鼠信息記錄
1.籠卡
籠卡上信息的記錄與填寫對於小鼠的管理非常重要!不僅有利於自己對小鼠的管理與使用;當你有時候需要小夥伴們幫忙處理小鼠時,他們也能輕鬆清楚地找到正確的小鼠,不會發生烏龍事件。
所以要及時給小鼠編號上戶口,更新籠卡信息,而且在換籠或實驗操作時要注意籠卡不要掛錯或遺失,以免造成混亂。
飼養籠的籠卡上一般包括以下信息:
而繁殖籠的籠卡上則一般包含以下信息:
2.飼養記錄
除了籠卡以外,我們還要用表格把所有的小鼠情況匯總記錄下來,可以包括小鼠的編號、出生日期、代次、性別、基因型信息、親代小鼠信息、交配日期、目前狀態、體重信息等等。
這樣就可以方便地進行管理和統計啦,及時總結還可以儘早發現繁育過程中出現的問題,比如不育、出生率低、雌雄比例失調、小鼠發育遲緩等等。
千里之行始於足下,好的記錄習慣可以做到有跡可循、有源可溯,這對後續較為複雜的不同基因型小鼠的繁育非常重要哦!
下期我們就將介紹轉基因、基因敲除與條件性基因敲除小鼠的繁育流程啦。
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