如果你是說原核表達上清蛋白是分泌到培養基的話，那需要你構建分泌蛋白的信號肽，使你的目的蛋白可以分泌出來，不過原核分泌蛋白比較難以分泌到培養基中，一般都是胞內表達，通過破碎細胞的方式獲得可溶性蛋白（在細胞的破碎上清液中），通過理性的方式獲取可溶性蛋白上清液，之後再純化就行.

一般原核表達本身的局限性就是包涵體表達。雖然能短時間獲得大量蛋白，但是由於本身摺疊不正確，無法糖基化修飾，造成包涵體表達。如何得到上清蛋白呢？一般認為有以下幾種方法。

1.改變誘導條件，如降低溫度，如28或16度，相應地增加誘導時間。降低IPTG的濃度，也可以增加上清的可能性。

2.使用利於二硫鍵形成的表達菌株也可以促進可溶性表達。

3.使用一些促溶標籤表達載體，也可以促進可溶性表達。

4.優化序列，盡量避免糖基化修飾等一系列不利於原核表達。這樣可溶性的蛋白可能性就會大大提高。

基本都是這些操作，實在不行就真核表達。望採納。